В рабочей поездке приняли участие специалисты подведомственного Россельхознадзору ФГБУ «ВНИИКР» Ю.А. Шнейдер и Г.Н. Мугол Хан. Институт сельскохозяйственных исследований (IVIA) является автономным органом при Департаменте сельского хозяйства, рыболовства и продовольствия Испании.
В рабочей поездке приняли участие специалисты подведомственного Россельхознадзору ФГБУ «ВНИИКР» Ю.А. Шнейдер и Г.Н. Мугол Хан.
Институт сельскохозяйственных исследований (IVIA) является автономным органом при Департаменте сельского хозяйства, рыболовства и продовольствия Испании.
В IVIA разрабатываются новые методы исследований, результаты которых применяются на практике в других институтах и лабораториях. Лаборатория вирусологии IVIA представлена 2 подразделениями: в первом изучаются вирусы и фитоплазмы на косточковых, семечковых, цитрусовых культурах, во втором — вирусы овощных, травянистых и декоративных культур.
Одним из направлений деятельности лаборатории вирусологии является создание наборов для иммуноферментного анализа к вирусу шарки слив, а также разработка и получение специфических антител к различным штаммам PPV.
Руководителем лаборатории является ведущий мировой вирусолог Мариано Камбра — автор диагностических протоколов ЕОКЗР и МККЗР по вирусу шарки слив (Plumpoxvirus), а также один из руководителей проекта SharCo, цель которого — изучение свойств, распространения и методов диагностики вируса шарки слив.
В ходе стажировки специалистами Россельхознадзора протестированы образцы косточковых культур, зараженных разными штаммами вируса шарки слив с использованием 11 тест-систем для иммуноферментного анализа с поликлональными и моноклональными антителами, произведенными в IVIA, а также Bioreba (Швейцария) и новыми разработанными антителами 4В7С4 (Италия). Образцы исследовались на наличие штаммов Winona, Cherry, T, ElAmar вируса шарки слив. По результатам анализа подтверждено заражение новым штаммом PPV-CR (CherryRussian) двух образцов вишни из Саратовской области, выявленным сотрудниками лаборатории вирусологии ФГБУ «ВНИИКР» в 2011г.
Также все образцы проанализированы методом Real-timeRT-PCR, с использованием новой технологии, разработанной в лаборатории вирусологии в IVIA. Данная модификация не требует выделения РНК из образца растения, а продолжительность анализа составляет примерно 3 часа.
Освоены новые методы выделения ДНК и РНК фитоплазмы пролиферации яблони CandidatusPhytoplasmamali и фитоплазмы истощения груши CandidatusPhytoplasmapyriиз растительной ткани яблони и груши с помощью набора DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen, Германия) и набора UltraClean Plant RNA Isolation Kit (MO-BIO, USA).
Для выявления фитоплазмы истощения груши CandidatusPhytoplasmapyri был применен метод ПЦР «в реальном времени» с универсальными и специфическими праймерами.
Кроме того, в процессе стажировки освоен метод закладки на длительное хранение лиофилизированных растительных образцов, а также методы хранения образцов растительного происхождения без применения заморозки, так называемый метод «ScreenPrint» — оттиск поперечного среза части растения на подготовленной бумаге.
